影响电泳加工度的要素

电泳加工

1、电渗效果

在支持物的电泳中，影响电泳的另一个重要要素是电渗效果。所谓电渗就是指在电场中液体对固体支持物的相对移动，

例如在pH8.6时，血清蛋白质进行纸电泳时，γ球蛋白与其他蛋白质相同带负电荷，应该向正极移动，但是它却向负极方向移动，

这就是电渗效果的效果。滤纸的纤维间具有很多孔隙带有负电荷，如一束毛细管，进行电泳时蛋白质通过这些孔隙向前移动。

纸的孔隙带有负电荷，与带电颗粒相同能够招引正离子，因而介质沿管壁相对地带的较多的正电荷。在电场中，

带负电荷的蛋白质向正极移动，而介质却向反向阴极移动，从而对蛋白质颗粒的电泳加工起阻遏效果。

因为γ球蛋白分子颗粒大，净电荷较少，移动速度慢，电渗效果大于颗粒向前电泳加工的力，效果γ球蛋白向撤退。

而其他血清蛋白质，因分子较小，净电荷较多，电渗效果小于分子向前移动的力，

因而分子向前移。所以，血清蛋白质电泳后球蛋白反而在点样方位之后。

2、溶液的pH值

溶液的pH值挑选了带电颗粒解离的程度，也挑选了物质所带净电荷的多少，关于蛋白质，氨基酸等两性电解质而言，

溶液pH值离电点越远，颗粒所带净电荷越多;电泳速度越快;反之则越慢。例如血清中几种首要蛋白质的等电点各不相同，

白蛋白等电点是4.0。α2球蛋白等电点是5.06，β球蛋白等电点是5.1，γ球蛋白等电点是7.1。当在pH8.6的电泳缓冲液中电泳时，

这些蛋白质都带负电荷，它们的电泳加工速度是白蛋白< α2球蛋白>β球蛋白>γ球蛋白。因而，当要别离一种蛋白质混合物时，

应挑选一种能扩展各种蛋白质所带电荷量差异的pH值，以利于各种蛋白质分子的解离。一起，为坚持电泳过程中溶液pH稳定也须运用缓冲液。

3、溶液的离子强度

溶液的离子强度是另一个重要挑选的条件，在坚持满足缓冲能力前提下，离子强度要最小。溶液的离子强度越高，

带电颗粒电泳加工速度越慢，反之越快。浓度大的缓冲液在合适电压下，有较低的电阻和较大的电流，产热较高。

假设这种额定的热能够遣散，高浓度的缓冲液松散常数较低，能够产生较窄细的电泳区带。

离子强度很高时要用低电压，防止过多产热，这样又导致长的电泳时间，致使增加变性和区带别离困难。